一、發(fā)酵罐滅菌操作1.關(guān)閉所有供水管路及空氣管路。開啟蒸汽管路閥門。同時(shí)稍開啟發(fā)酵罐夾套的排氣閥門，排放夾套剩水。2.開啟發(fā)酵罐攪拌電機(jī)，轉(zhuǎn)速至200rpm，使發(fā)酵液受熱均勻。當(dāng)溫度升到95℃以上時(shí)，即可停止攪拌。然后待溫度升至121℃（罐壓在0.1——0.12Mpa）時(shí)即可計(jì)時(shí)開始。3.當(dāng)計(jì)時(shí)開始后，發(fā)酵時(shí)間一般為20-30分鐘。在此時(shí)間內(nèi)應(yīng)保證溫度不低于120℃。同時(shí)可進(jìn)行空氣過濾器及空氣管道的滅菌。4.空氣過濾器及空氣管道的滅菌：稍開過濾器的排水閥門，及空氣管道的隔膜閥，保證空氣管道的蒸汽滅菌。但不能開的太大，以免蒸汽大量進(jìn)入罐內(nèi)，而稀釋培養(yǎng)基。5.出料、采樣閥的蒸汽閥門及出口閥稍開，保證該管路滅菌。在發(fā)酵罐的蓋上的接種口，同樣需要放氣，使其達(dá)到滅菌要求。6.當(dāng)保溫結(jié)束時(shí)，應(yīng)先把空氣管路中的隔膜閥關(guān)閉。把空氣過濾器排水閥關(guān)閉，以及關(guān)閉取樣閥出口閥門和接種口螺帽。然后再關(guān)閉各路蒸汽閥門。7.打開冷卻水閥門及排水閥門，同時(shí)打開空氣流量計(jì)和空氣放空閥門，把空氣過濾器吹干。此時(shí)必須注意罐壓的變化。不能讓罐壓低于0.02Mpa。及當(dāng)罐壓達(dá)到0.05Mpa時(shí)，立即將空氣管路打開，保證發(fā)酵罐的罐壓在0.05Mpa左右。8.當(dāng)溫度降到95℃時(shí)，即可打開攪拌。當(dāng)溫度低于50℃后，即可切入自動(dòng)控溫狀態(tài)，使培養(yǎng)基達(dá)到接種溫度，滅菌過程即告結(jié)束。二、發(fā)酵罐發(fā)酵過程的操作1.接種：接種方法可采用火焰接種法或差壓接種法。（1）火焰接種法：在接種口用酒精火圈消毒，然后打開接種口蓋，迅速將接種液倒入罐內(nèi)，在把蓋擰緊。（2）差壓法：在滅菌前放入墊片，接種時(shí)把接種口蓋打開，先倒入一定量的酒精消毒。待片刻后把種液瓶的針頭插入接種口的墊片。利用罐內(nèi)壓力和種液瓶內(nèi)的壓力差，將種液引入罐內(nèi)，擰緊蓋子。2.罐壓發(fā)酵過程中須手動(dòng)控制罐壓，即用出口閥控制罐內(nèi)壓力。調(diào)節(jié)空氣流量的，須同時(shí)調(diào)節(jié)出口閥，應(yīng)保持罐內(nèi)壓力恒定大于0.03Mpa。3.溶解氧（DO）的測量和控制（1）溶解氧的標(biāo)定：在接種前，在恒定的發(fā)酵溫度下，將轉(zhuǎn)速及空氣量開到A大值時(shí)的溶解氧DO值作為。（2）發(fā)酵罐發(fā)酵過程的溶解氧DO測量和控制：DO的控制可采用調(diào)節(jié)空氣流量和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速來達(dá)到。簡單是轉(zhuǎn)速和溶氧的關(guān)聯(lián)控制。其次則必須同時(shí)調(diào)節(jié)進(jìn)氣量（手動(dòng)）控制。有時(shí)需要通入純氧（如在某些基因工程菌的高密度培養(yǎng)中）才能達(dá)到要求的DO值。4.pH的測量與控制（1）pH值的校正：在滅菌前應(yīng)對PH電進(jìn)行PH值的校正。（2）發(fā)酵罐在發(fā)酵過程中PH值的控制使用蠕動(dòng)泵的加酸加堿來達(dá)到的，酸瓶或堿瓶須先在滅菌鍋中滅菌。

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